产品说明
本产品是针对多重PCR,专门研发的抗体法热启动Multiplex PCR试剂盒。试剂盒所用Taq酶为新一代热启动Taq DNA聚合酶,大大提高了模板-引物DNA的结合力,从而使扩增特异性和扩增产量得到显著提升。多重PCR缓冲体系经专门优化,可兼容宽泛的产物GC含量、引物Tm值,同时亦可兼容全血、血卡等样本直扩,无需额外优化,即可在60℃通用退火温度下完成大多数多重PCR检测。
本试剂盒的热启动Taq聚合酶搭配专门优化的PCR Buffer,极大地提高了PCR的扩增效率,使同一个PCR反应体系中所有的引物都能得到高效延伸,无需额外优化;同时PCR扩增偏好性很低,对不同类型的引物和模板扩增效率一致性高,在获得极高产量的同时保持良好的多重片段扩增均一性和特异性,可以有效减少由引物错配引起的非特异性扩增。
产品组成
组 分 | AK0101A(200次/20μl) | AK0101B(1000次/20μl) |
2×Multiplex Buffer (High specificity) | 2 × 1 ml | 10.0 ml |
Multiplex Taq DNA Polymerase (5 U/μl) | 80 μl | 400 μl |
保存
-30至-20℃保存,-20度至4℃运输
产品特点
高均一性:所有的引物都能得到高效延伸;对不同类型的引物和模板扩增效率一致;
高特异性:有效减少由引物错配引起的非特异性扩增;
高产量:在各种体系中,扩增产物产量很高;
良好兼容性:兼容不同GC含量(25%-75%)扩增片段,兼容不同Tm值的引物。
适用范围
多重PCR扩增;MLPA(multiplex ligation probe amplification)扩增;病原体的多重PCR检测和分型;分子杂交检测等。
测和分型;分子杂交检测等。
注意事项
1. 引物设计对于多重PCR扩增的成功与否至关重要。首先,引物设计需要满足常规的引物设计规则,避免出现非特异性扩增和无法扩增。同时,应逐一PCR验证设计好的引物对,选择效果较好的引物对用于多重PCR扩增。推荐使用PAGE纯化的高质量引物。
2. 用于多重PCR扩增,推荐目标片段不超过3,000 bp。
3. 推荐每条引物终浓度为0.2 μM。由于不同批次合成的引物产量有差异,在新合成的引物使用前,应先通过PCR对其真实浓度进行校准。如某些目标片段扩增产量偏低,可适度提高对应引物用量,以提高该片段扩增产量。
4. 扩增产量低时,可适当提高引物浓度;发生非特异性扩增时,可适当降低引物浓度。