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产品说明：
Taq DNA 聚合酶是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌 Thermus aquaticus 来源的热稳定型 Taq DNA 聚合酶，分子量为 94 kDa。本酶经特殊改造，具有超强扩增能力和延伸速度，扩增片段的长度可达 5-6 kb，延伸速度为 2-3 kb/ min（72℃）。该酶具有 5’→3’聚合酶活性，较弱的 5’→3’外切酶活性；无 3’→5’外切酶活性。扩增产物具有 3'-dA 尾巴。Taq DNA Polymerase for PAGE 配有特殊的缓冲液，其PCR产物适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳。
以大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 72℃、30 min 内，将 10 nmol 脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。
浓度：5U/μl
保存条件：-20℃保存特点
Ø 热稳定性好：95℃下半衰期超过 40 min；
Ø PCR 产物具有 3’-dA 尾巴，可直接用于 T/A 克隆；
Ø 模板 DNA 耐受范围广；
Ø 可以掺入 dUTP、dITP、荧光标记核苷酸。适用范围
Ø 常规 PCR 扩增；
Ø 菌落 PCR；
Ø TA 克隆 PCR 产物添加 3’-dA；
Ø DNA 荧光标记。产品包装规格及组成
Component | AE0117A/ AE0118A* | AE0117B/ AE0118B* | AE0117C/ AE0118C* | AE0117D/ AE0118D* |
Taq DNA polymerase for PAGE | 500U | 500U×5 | 2500U×4 | 2500U×10 |
10×Taq Buffer for PAGE | 1.0 ml×1 | 1.0 ml×5 | 5.0 ml×4 | 5.0 ml×10 |
2 mM dNTPs | -/1.0 ml×1 | -/1.0 ml×5 | -/5.0 ml×4 | -/5.0 ml×10 |
*附带 2mM dNTP 混合物。质量控制
相关测试表明无外源内切或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR 方法检测无宿主残余 DNA。
室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20 度。酶贮存缓冲液
20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween
20, and 50% glycerol.
注：以下反应举例为 50 μl 标准PCR 体系，仅供参考。实际PCR 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。
组份 | 体积/μl | 终浓度 |
10×Taq Buffer | 5 | 1× |
dNTPs（2.0 mM） | 5 | 0.2 mM |
引物 F（10 μM） | 1.5 | 0.3 μM |
引物R（10 μM） | 1.5 | 0.3 μM |
Template | Varable* | / |
Taq（5U/μl） | 0.5 | 2.5U |
ddH2O | Varable | / |
总体积 | 50 | / |
*DNA template 可参照如下标准（50 μl PCR 体系）：
l 人类基因组 DNA | 0.1 μg-1 μg |
l λDNA | 0.5 ng-5 ng |
l 质粒 DNA | 0.01 ng-1 ng |
l 大肠杆菌 DNA | 10 ng-100 ng |
PCR 反应条件
95℃ | 5 min | |
95℃ | 15 sec | |
55~72℃ | 20 sec | 30 Cycles |
72℃ | 1-2kb/min | |
72℃ | 5 min |
注意事项
l Taq DNA 聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在 PCR 产物 3’末端通常会加上 1 个多余的腺嘌呤。
l 碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq DNA 聚合酶的碱基错误率为 1×10-5。
l 建议在冰上配置 PCR 反应液后，再放入PCR 仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性， 减少非特异性扩增，得到良好的PCR 结果。
l 如进行 PCR 扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议适当减少体系中的 Taq 酶用量， 以增加 PCR 扩增反应的特异性。
l 本公司 Buffer 经大量 PCR 反应实例优化而成，然而对某些PCR 反应存在一个最优的镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的 buffer 和 MgCl2/MgSO4。
警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。
