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产品说明：
HiFi Taq DNA 聚合酶基于Barnes方法开发的高效率PCR酶。将具有强3'→5'核酸外切酶活性（proof-reading活性）的KOD DNA polymerase与Taq DNA polymerase以最佳比例混合，从而实现了卓越的PCR性能,并提高了保真性。两种酶均经特殊改造，具有超强扩增能力和延伸速度，扩增片段的长度可达 5-6 kb，延伸速度为 1-2 kb/ min（72℃）。该酶具有 5’→3’聚合酶活性，较弱的 5’→3’外切酶活性；优化的3’→5’外切酶活性。少量扩增产物具有 3'-dA 尾巴。
以大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 72℃、30 min 内，将 10 nmol 脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。
浓度：5U/μl
保存条件：-20℃保存特点
Ø 热稳定性好：95℃下半衰期超过 40 min；
Ø 少量PCR 产物具有 3’-dA 尾巴，直接进行 T/A 克隆效率稍低；
Ø 模板 DNA 耐受范围广。
适用范围
Ø 常规 PCR 扩增；
Ø 菌落 PCR；
Ø Multiplex PCR；
Ø DNA 荧光标记。产品包装规格及组成
Component | AE0109A/ AE0110A* | AE0109B/ AE0110B* | AE0109C/ AE0110C* | AE0109D/ AE0110D* |
Taq DNA polymerase | 250U | 250U×5 | 1250U×4 | 2500U×5 |
10×HiFi Taq Buffer | 0.5 ml×1 | 1.0 ml×3 | 5.0 ml×2 | 5.0 ml×5 |
2 mM dNTPs | -/0.5 ml×1 | -/1.0 ml×3 | -/5.0 ml×2 | -/5.0 ml×5 |
*附带 2mM dNTP 混合物。质量控制
相关测试表明无外源内切或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR 方法检测无宿主残余 DNA。
室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20 度。酶贮存缓冲液
20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween
20, and 50% glycerol.
注：以下反应举例为 50 μl 标准PCR 体系，仅供参考。实际PCR 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。
组份 | 体积/μl | 终浓度 |
10×Taq Buffer | 5 | 1× |
dNTPs（2.0 mM） | 5 | 0.2 mM |
引物 F（10 μM） | 1.5 | 0.3 μM |
引物R（10 μM） | 1.5 | 0.3 μM |
Template | Varable* | / |
HiFi Taq（5U/μl） | 0.5 | 2.5U |
ddH2O | Varable | / |
总体积 | 50 | / |
*DNA template 可参照如下标准（50 μl PCR 体系）：
l 人类基因组 DNA | 0.1 μg-1 μg |
l λDNA | 0.5 ng-5 ng |
l 质粒 DNA | 0.01 ng-1 ng |
l 大肠杆菌 DNA | 10 ng-100 ng |
PCR 反应条件
95℃ | 5 min | |
95℃ | 15 sec | |
55~72℃ | 20 sec | 30 Cycles |
72℃ | 1-2kb/min | |
72℃ | 5 min |
注意事项
l HiFi Taq DNA 聚合酶虽然具有脱氧核苷酸转移酶活性，可以在 PCR 产物 3’末端通常会加上 1 个多余的腺嘌呤，但含有的少量KOD聚合酶具有很强的3’-5’外切酶活性，因此PCR产物3’-A的比例较低。
l 碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。HiFi Taq DNA 聚合酶的碱基错误率为 3×10-5。
l 建议在冰上配置 PCR 反应液后，再放入PCR 仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性， 减少非特异性扩增，得到良好的PCR 结果。
l 如进行 PCR 扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议适当减少体系中的 HiFi Taq 酶用量， 以增加 PCR 扩增反应的特异性。
l 本公司 Buffer 经大量 PCR 反应实例优化而成，然而对某些PCR 反应存在一个最优的镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的 buffer 和 MgCl2/MgSO4。
警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。
