海洋细菌SSB是细菌DNA复制必需的一种单链DNA(ssDNA)结合蛋白,结合并稳定瞬时形成的ssDNA区域,在DNA 复制过程中维持ssDNA结构。SSB可以提高RT-PCR中反转录的效率、促进限制性内切酶的消化反应、增强DNA 聚合酶的活性、提高PCR 产量与扩增特异性、减少引物二聚体形成。
本公司海洋细菌SSB 是重组表达,多步纯化的重组蛋白。具有ssDNA结合能力强,抑制引物二聚体形成活性高。
活性定义
本品按纯蛋白质量浓度销售。
浓度:2mg/ml
保存条件:-20℃保存
特点
Ø 在 RT-PCR 过程中,增加反转录的产量和延伸能力;
Ø PCR 时,增加目的片段的产量和特异性;
Ø 稳定和标记 ssDNA 结构;
Ø 适用于所有PCR buffer、等温核酸扩增buffer;
Ø 热失活:65℃ 加热 20 分钟。
适用范围
Ø 反转录反应、PCR;
Ø 体外转录;
Ø 其它需要结合ssDNA的实验。
Ø 电镜观察细胞内的DNA结构
产品包装规格及组成
Component | AE1910A | AE1910B | AE1910C |
海洋细菌 SSB | 0.2mg | 1mg | 4mg |
质量控制
相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。
酶贮存缓冲液
20 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,0.5 mM DTT,1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 8 @ 25°C。
使用实例:
1、降低PCR的引物二聚体
1)在冰上按下表配制反应体系
反应组分 | 体积或浓度 |
10×PCR Buffer | 5ul |
T4 SSB | 1-2ul |
引物-F(10uM) | 1.5 |
引物-R(10uM) | 1.5 |
DNA template | 10-100ng |
Taq酶(5U/µl) | 0.5ul |
H2O | Y ul |
总体积 | 50ul |
2)PCR反应,
3)琼脂糖电泳检测扩增产物,或按实验目的进行后续操作。
警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。
注意事项
l 65℃加热20分钟可以完全失活。
l 反转录实验应该遵守RNA操作规则,并添加RNase Inhibitor。