RecA蛋白在基因重组中是不可缺少的,它参与DNA修复和紫外线诱导的突变。RecA促进lexA抑制子、umuD蛋白和lambda抑制子的自裂解。切割 LexA 能促进20多种基因的表达。体外研究证明:在ATP参与下,RecA促进单链DNA与同源双链DNA发生链置换,需三步完成:
(1)RecA与单链DNA结合;(2)核蛋白丝结合到双链DNA上寻找同源部分;(3)链置换。
本公司RecAf蛋白是重组表达,并经多步纯化的带His标签序列RecA重组蛋白,分子量 39.5 kDa。
活性定义
本品按质量浓度销售。
活性测定条件
70 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,5 mM DTT(pH 7.6 @ 25℃),37℃ 温育。
浓度:2ug/μl
保存条件:-20℃可保存2年,避免反复冻融
特点与适用范围
Ø 电镜分析DNA结构
Ø 用RecAf蛋白包被的探针来进行文库筛选
Ø 在单个预先决定的位点切割DNA
Ø RecAf介导全长cDNA克隆的亲合捕获
产品包装规格及组成
Component | AE1907A | AE1907B | AE1907C |
RecAf蛋白 | 0.2mg | 1mg | 4mg |
10× RecA Buffer | 0.2ml | 0.5ml | 1.5ml |
质量控制
经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
酶贮存缓冲液
10 mM Tris-HCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,50% Glycerol,pH 7.4 @ 25°C
使用实例:
1)按下表配制反应体系
反应组分 | 体积或浓度 |
10×Buffer | 2ul |
DNA底物 | Xul |
RecAf(2ug/µl) | 1-2ul |
H2O | Yul |
总体积 | 20ul |
2)37℃×30min反应,
3)非变性PAGE电泳检测RecAf结合单链DNA底物活性,或按实验目的进行后续操作。
警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。
注意事项
l 热失活:65℃加热20分钟。
l 本产品部分用途需要ATP参与,未提供ATP。