产品说明

无机焦磷酸酶（酿酒酵母，Saccharomyces cerevisiae）催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐：P₂0₇^–4 + H₂0 →2HP0₄^–2。焦磷酸水解酶在核酸扩增实验中，其可解除生成的无机焦磷酸盐对反应体系的抑制，提高RNA和DNA的合成产量。

本公司酵母无机焦磷酸酶是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1活性单位指在20℃下， 1×无机焦磷酸酶反应缓冲体系下，1 min催化无机焦磷酸盐生成1μmol磷酸盐所需的酶量。

活性测定条件

1× Buffer：20 mM Tris-HCl，pH 7.5，2 mM MgCl₂ and 2 mM PPi，

浓度：0.2U/μl

保存条件：-20℃可保存2年，避免反复冻融

特点与适用范围

Ø 提高体外转录反应中RNA产量

Ø 增强DNA复制能力

产品包装规格及组成

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl，100 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 8.0 @ 25°C

使用实例1：水解无机焦磷酸

1）按下表配制反应体系

2）25℃×10min反应，

3）20μl 0.1mM 柠檬酸终止反应，

4）按实验目的进行后续操作。

使用实例2：增加体外转录RNA合成量

1）按如下表格配制体外RNA转录反应液

2）按设定条件进行体外转录，结束后琼脂糖胶电泳检测RNA转录产物

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l 该酶在多种反应Buffer中均具有活性，通常该酶在RPA扩增、RNA体外转录等实验中，可直接加入酶即可。

l 该酶的用量在不同的实验中需要优化，通常在0.05~1U/ml浓度调整。

l 该酶的最佳反应温度为25℃，其在16~37℃均有活性，65℃ 10min可使该酶失活，因此不适合于Bst DNA聚合酶催化的LAMP扩增。

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