产品说明

核酸内切酶 V 是在 E. coli 中发现的一种 DNA 修复酶，大小为24.9 kDa。它识别 DNA 中的脱氧次黄嘌呤碱基，即腺嘌呤的脱氨基产物。核酸内切酶 V，也称为脱氧次黄嘌呤 3´ 内切酶，识别含脱氧次黄嘌呤（无论配对与否）的双链或单链 DNA。也可识别含脱碱基（AP）位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flaps 和类 -Y 型结构的 DNA，但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶V发挥DNA修复功能时，还需另外一种蛋白的存在，因为它不能切除 DNA 上的脱氧次黄嘌呤碱基或受损碱基。最新报导表明内切核酸酶V还可以识别RNA中的次黄嘌呤碱基（I），并主要在I碱基3’端的第二个磷酸二酯键切断RNA链。

核酸内切酶V对脱氧次黄嘌呤碱基 3´ 端第一、二个磷酸二酯键进行切割，产生一个 3´ 羟基、5´ 磷酸的切刻，第一个磷酸二酯键的切割比例为第二个的约10%。 

本公司内切核酸酶V是在大肠杆菌中重组表达，并亲和纯化的重组大肠杆菌内切核酸酶V。

活性定义

1单位指在温度为37℃反应条件下，60min内能切割 1 pmol 含单脱氧次黄嘌呤碱基位点的34 mer寡核苷酸双链所需的酶量。

活性测定条件

1×AM Buffer D：50 mM Potassium Acetate，20 mM Tris-acetate，10 mM Magnesium Acetate，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25°C)

脱氧次黄嘌呤核苷位点的制备：合成34 mer寡核苷酸双链时，在其一条链的中间掺入脱氧次黄嘌呤碱基（dI）。 

浓度：10U/μl

保存条件：-20℃保存

特点

Ø 热失活：65℃ 加热20min。

适用范围

Ø 切割含脱氧次黄嘌呤碱基的DNA和RNA寡核苷酸

Ø 切割错配碱基对DNA，活性很弱 

产品包装规格及组成

质量控制

相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。

酶贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl，250 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，200 µg/ml BSA ，0.15% Triton® X-100，50% Glycerol ，pH 8 @ 25°C。

应用举例

切断单链或双链DNA中dI碱基下游的磷酸二酯键

按如下表格配制反应液

37°C反应30-60min。

75°C加热15分钟，失活酶。

8M尿素变性PAGE电泳检测切割效果。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l 内切酶V在AM Buffer A、B、D中具有完全活性，在AM Buffer C中只有75%的活性。

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