产品说明

核酸内切酶 IV来源于大肠杆菌，是一种脱嘌呤/脱嘧啶（AP）位点特异性的核酸内切酶，在DNA 上的完整 AP 位点的5’端第一个磷酸二酯键处切割DNA，产生 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。除天然的AP位点外，各种人工合成的Spacer分子也能够被内切核酸酶IV有效切割，包括THF、Spacer C3、Spacer C12、Spacer 9，Spacer 18等。该酶也具有 3´ 二酯酶活性，能从 DNA 的 3´ 末端释放磷酸甘油醛（phosphoglycoaldehyde）、α,β-不饱和醛（α,β-unsaturated aldehydes）、3’-磷酸、其它3' blocking groups。该酶还能够作用于 DNA 分子上的几种氧化性损伤，水解氧化损伤碱基的5’端第一个磷酸二酯键。 同时内切核酸酶IV还具有3’-5’外切核酸酶活性，该活性弱于AP位点特异性的内切酶活性。

本公司内切核酸酶IV是重组表达，并经多步纯化制备的大肠杆菌内切核酸酶IV。

活性定义

1 活性单位指在37℃，1小时切割 1 pmol 含一个 AP 位点的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。

活性测定条件

1×AM Buffer C：50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃），37℃ 温育。

AP 位点底物制备方法如下：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖苷酶（UDG）处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。

浓度：10U/ul。

保存条件：-20℃保存

特点与应用

Ø 细胞凝胶电泳（彗星试验）

Ø DNA损伤检测

Ø 切断DNA中的各种Spacer分子

Ø RPA等温扩增中荧光探针切割 ，释放荧光信号

Ø 热失活：85℃ 加热 20 分钟。

产品包装规格及组成

质量控制

核酸内切酶 IV 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 8.0 @ 25°C

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AE1101: EcUDG

应用举例

切断单链或双链DNA中的Spacer的磷酸二酯键

按如下表格配制反应液

37°C反应30-60min。

75°C加热15分钟，失活酶。

8M尿素变性PAGE电泳检测切割效果。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l 彗星试验的推荐稀释度：1:10⁴至1:10⁵。

l Endo IV在AM Buffer B中活性为100%，在AM Buffer D1中活性为25%。不建议在AM Buffer A中使用Endo IV。

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