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产品说明
SUMO Protease (SUMO蛋白酶，亦称Ulp蛋白酶)，是一种起源于Saccharomyces cerevisiae Ulp的具有高活性的半胱氨酸蛋白酶，SUMO蛋白酶能够特异性的识别并且高效的将泛素三级结构（UBL）类似的SUMO（Small Ubiquitin-Like Modifier）从融合蛋白上割下来，而不是氨基酸序列，所以该蛋白可以切割去除重组融合蛋白的SUMO标签。SUMO Protease 酶切的最适温度为30°C，该酶在较宽的温度（4°C -30°C）和PH(PH7.0-9.0)范围内均有活性。SUMO蛋白酶带有多聚His标签，酶切后，可采用亲和层析的方法很容易的将SUMO去除。
活性定义
在30°C条件下反应1h，能够切割85%以上的2ug反应底物所需要的酶量定义为1个活性单位。
活性测定条件
50mM Tris-HCL(pH7. 8)，0.1% NP-40，150 mM NaCl中，30°C温育1h。
浓度：10U/μl
保存条件： -20°C
特点与应用
Ø 带有多聚His标签，酶切后，可采用亲和层析的方法去除。
Ø 切除SUMO标签融合蛋白上的SUMO标签，获得无标签的目的蛋白
产品包装规格及组成
Component | AE0502A | AE0502B | AE0502C |
SUMO Protease | 200 | 1000 | 1000U x 4 |
10×SUMO Buffer（+salt） | 0.5ml | 1.5ml | 5ml |
酶贮存缓冲液
25mMTris-HCl（pH8.0）, 250mM NaCl，0.1mM DTT，0.1% NP-40，50%glycerol
注意事项
l 为达到最好的酶切效果，请确保酶切反应中重组融合蛋白为部分或完全纯化的蛋白。
l 对于大部分融合蛋白，为达到较好的酶切效果，SUMO 蛋白酶可在 NaCl 浓度为 150mM 的反应液中进行反应。如有需要，可根据实际情况在 100mM-300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到理想效果。切记实验中一定要考虑酶及融合蛋白中的盐离子浓度。
l 保持咪唑浓度低于 150mM，若高于 150mM 会影响 SUMO 蛋白酶的活性。
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1. 按如下表格配制反应液
组份 | 体积/μl |
SUMO 融合蛋白 | 10μg |
10XSUMO Buffer（+salt） | 10 |
SUMO Protease（10U/ul） | 1 |
ddH2O | Variable |
总体积 | 100 |
2. 混匀后在 30℃条件下温育，分别在 1h、2h、4h、6h 后取出 20ul 样品；
3. 向每个样品中加入等体积的 2×SDS 样品缓冲液，进行SDS电泳检测目标蛋白切割效果。
警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。
注意事项
l 为达到最好的酶切效果，请确保酶切反应中重组融合蛋白为部分或完全纯化的蛋白。
l 对于大部分融合蛋白，为达到较好的酶切效果，SUMO 蛋白酶可在 NaCl 浓度为 150mM 的反应液中进行反应。如有需要，可根据实际情况在 100mM-300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到理想效果。切记实验中一定要考虑酶及融合蛋白中的盐离子浓度。
l 保持咪唑浓度低于 150mM，若高于 150mM 会影响 SUMO 蛋白酶的活性。
