产品说明

本酶具有从 3´ →5´方向水解单链 DNA 的外切酶活性。在进行Sanger DNA测序或SNP分析之前，在PCR反应中去除单链引物，去除用于巢式PCR反应的单链引物，去除线性单链DNA，在样品中留下双链DNA。

本公司Exonuclease I是重组表达，并多步纯化的重组大肠杆菌exonuclease I，分子量为51 kDa。

活性定义

1 单位指在 37℃ 条件下，30 分钟内催化释放 10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。

活性测定条件

1×反应Buffer：67 mM Glycine-KOH（pH 9.5 @ 25℃，6.7 mM MgCl₂，10 mM 2- β-ME

浓度：20 U/ul

保存条件：-20℃保存

特点

Ø  ssDNA特异性3’外切核酸酶；

Ø  热失活：80℃ 加热 20 分钟。

适用范围

Ø  3´单链DNA去除反应，保留dsDNA；

Ø  PCR 扩增后降解引物；

Ø  巢式PCR 扩增后降解引物；

Ø  其它需要降解ssDNA的实验。

产品包装规格及组成

质量控制

相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。

酶贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，5 mM β-ME，0.5 mM EDTA，100 µg/ml BSA，50% Glycerol，pH 7.5 @ 25°C。 

相关产品

AE2201：EcRecJ核酸酶（5' to 3’），AE2206：耐热RecJ nuclease（3' to 5’）

应用实例

1.去除PCR产物中的引物

1）按下表配制反应体系

2) 37°C反应30min；

3) 80°C加热20min，使酶失活。

4) 进行后续实验

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l  不适合5’单链DNA的去除，如需去除5’单链DNA请选用本公司RecJ核酸酶产品（AE2201）。

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