产品说明

本RecJ核酸酶来源于耐热古细菌，不同于细菌RecJ核酸酶。本酶作用于单链DNA和单链RNA，沿 3´ →5´ 方向水解ssDNA和ssRNA，生成3’-OH的单链DNA、单链RNA、单核苷酸。且单链RNA水解活性高于单链DNA底物。本酶具有很好的热稳定性，95度半衰期达15分钟，在60-85度都有较高活性，对NaCl耐受度较低，高于50mM NaCl严重抑制酶活性。

本公司RecJ nuclease是重组表达，并经多步纯化制备的重组酶。

活性定义

1单位指在温度为50℃，1× RecJ Nuclease 反应缓冲体系的条件下，30 min内水解单链DNA产生50pmol溶于三氯乙酸的脱氧核糖核酸所需的酶量。

活性测定条件

20 mM Tris–HCl (pH 8.5)，30 mM NaCl，10 mM KCl，1 mM DTT，1.0 mM MnCl₂，65℃ 温育。

浓度：20U/μl

保存条件：-20℃保存

特点

Ø  特异性 3´ →5´ 单链DNA核酸外切活性

Ø  特异性 3´ →5´ 单链RNA核酸外切活性

Ø  热稳定性酶，在高温活性高于常温

适用范围

Ø  从3´ →5´方向降解单链DNA、单链RNA

Ø  去除线性双链DNA的3'突出的单链末端（可能产生3种末端：3´平齐末端、1-5 个核苷酸的3´ 突出末端、1-5 个核苷酸3´ 凹陷末端）

产品包装规格及组成

质量控制

相关测试表明无外源内切脱氧核糖核酸酶污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。

酶贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，200 µg/ml BSA，50% Glycerol ，pH 8.0 @ 25°C。 

相关产品

AE2201：Ec RecJ nuclease； AE2202：Ec exonuclease I

应用实例

1.去除PCR产物中的引物

1）按下表配制反应体系

2) 50-65°C反应30min；

3) 80°C加热20min，使酶失活。

4) 进行后续实验

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l  本酶在AM Buffer B中也具有活性，且添加Mn²⁺可以提高活性

l  相比Mg²⁺，Mn²⁺对酶活性有显著促进作用

l  对NaCl耐受度较低，高于50mM NaCl严重抑制酶活性，建议一价阳离子浓度不超过60mM

l  添加终浓度100 ug/ml BSA对酶活有一定促进作用

l  本酶不降解平末端双链DNA

l  失活：苯酚-氯仿抽提去除RecJ核酸酶。加入终浓度50mM EDTA也能够终止反应。

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