产品说明

RecJ核酸酶作用于单链DNA，沿 5´ →3´ 方向水解DNA，生成5’-磷酸的单链DNA和单核苷酸。细菌RecJ还能够水解5’-脱氧核糖磷酸（5’-deoxyribose phosphate）基团的活性，促进简介切除修复过程。当底物为 5´ 端突出了 22 个核苷酸的双链DNA时，经RecJ酶切后，可得到以下三种5´末端的DNA混合产物：5´平齐末端、5´ 突出末端（1-5 个核苷酸）和5´ 凹陷末端（1-8 个核苷酸）。RecJ水解单链DNA时无需ssDNA的5´ 末端磷酸化。

本公司大肠杆菌RecJ nuclease是重组表达的麦芽糖结合蛋白（MBP）融合蛋白，并经多步纯化的重组酶。MBP标签增强了 RecJ的溶解度，但对RecJ核酸酶活性没有影响。

活性定义

1单位指在温度为37℃，AM Buffer B缓冲体系下，30 min内水解单链DNA产生0.05 nmol溶于三氯乙酸的脱氧核糖核酸所需的酶量。

活性测定条件

AM buffer B，37℃ 温育。

浓度：30U/μl

保存条件：-20℃保存

特点

Ø  特异性 5´ →3´ 单链DNA核酸外切活性

Ø  首选底物是带有5'单链（长于6个核苷酸）的双链DNA

Ø  热失活：65℃×20 min

适用范围

Ø  从5´ →3´方向降解单链DNA

Ø  去除线性双链DNA的5'突出的单链末端（可能产生3种末端：5´平齐末端、1-5 个核苷酸的5´ 突出末端、1-8 个核苷酸5´ 凹陷末端）

产品包装规格及组成

质量控制

相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。

酶贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，200 µg/ml BSA，50% Glycerol ，pH 7.4 @ 25°C。 

相关产品

AE2202：Exonuclease I；AE2106:耐热RecJ nuclease（3' to 5’）

应用实例

1.        酶切反应

1）按下表配制反应体系

2) 37°C反应30min；

3) 65°C加热20min，使酶失活

4) 电泳检测单链DNA水解结果。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l  本酶在AM Buffer B中也具有活性，且添加Mn²⁺可以提高活性

l  相比Mg²⁺，Mn²⁺对酶活性有显著促进作用

l  本酶不降解平末端双链DNA

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