产品说明

T5 核酸外切酶沿 5´ →3´ 方向降解 DNA。它既能从 5´ 末端起始消化，也能从线性或环状双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化。但不能降解超螺旋双链 DNA，T5 核酸外切酶还具有单链 DNA 核酸内切酶活性。 

本公司T5 核酸外切酶是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1单位指在温度为37℃，1× T5 核酸外切酶反应缓冲体系的反应条件下，30min内水解双链DNA底物产生1nmol 酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。

活性测定条件

AM Buffer D，37℃ 温育。

浓度：10U/μl

保存条件：-20℃保存

特点

Ø  双链DNA特异性核酸外切酶和单链DNA内切酶

Ø  起始于线形或缺口双链DNA的5'末端

Ø  在5'到3'方向切割线性或缺口双链DNA

适用范围

Ø  环状双链DNA不完全连接产物的去除

Ø  碱性质粒中变性DNA的降解改进DNA克隆的纯化方法

Ø  质粒样品中污染线状和缺口DNA的降解，同时保持超螺旋质粒DNA。

Ø  去除碱裂解质粒纯化过程中分离的变性DNA。

Ø  从质粒cDNA文库中提高小肽的转染效率

Ø  应用于 Gibson 组装方法 

产品包装规格及组成

质量控制

相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。

酶贮存缓冲液

50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，0.1% Triton® X-100，50% Glycerol ，pH 7.5 @ 25°C。 

注意事项

l  T5 Exonuclease 不能切割硫代磷酸酯键。可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端保护起来，进行单向切割。 

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AE2105:  T7 核酸外切酶

应用实例

1.        酶切反应

1）按下表配制反应体系

2) 37°C反应30min；

3) 65℃加热15min，或加入EDTA至总浓度为10mM，终止反应；

4) 电泳检测DNA水解结果。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l  T5 Exonuclease 不能切割硫代磷酸酯键。可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端保护起来，进行单向切割。

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