产品说明

RNase T又称为核酸外切酶T（Exo T），是一种单链RNA或DNA特异性核酸酶，该酶需要游离的3´ 末端，以3´ →5´ 方向去除核苷酸。核酸外切酶T对于DNA的活性比RNA高十倍。核酸外切酶T可用于含有3´ 突出末端的RNA或DNA的末端平滑化。常温酶，65°C保温20min失活。

本公司RNase T是重组表达，并经多步纯化制备的大肠杆菌RNase T重组蛋白。

活性定义

1单位指在温度为25℃，1× AM Buffer D反应缓冲体系的条件下，30 min内水解1 nmol [3H]-标记的多聚胸腺嘧啶成0.1 nmol 三氯乙酸可溶的核苷酸所需的酶量。

活性测定条件

AM Buffer D，25°C 温育。

浓度：5U/μl

保存条件：-20℃保存

特点与适用范围

Ø  去除双链DNA的3’突出末端，形成平末端。

产品包装规格及组成

质量控制

相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。

酶贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，200 µg/ml BSA，50% Glycerol，pH 7.4@ 25°C。

应用实例

1、 3’突出端DNA的末端平滑化

1）按下表配制反应体系

2) 25-37°C反应30min；

3) 80°C加热20min，使酶失活。

4) 进行后续实验

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l Exo T对DNA和RNA的反应效率不同，DNA是RNA的100倍。对于 RNA，在标准反应条件下，完全消化1.0 pmole rA20需要1单位 Exo T，反应结果通过凝胶电泳检测。 

l 在温度45度以下都有活性，虽然活性测定温度为25度，但在25-37度范围内活性更高。

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