产品说明
耐热细菌SSB为热稳定蛋白,来源于嗜热细菌,是细菌DNA 复制和修复所必需的一种单链 DNA(ssDNA)结合蛋白,具有ssDNA结合活性。耐热细菌SSB结合并稳定瞬时形成的 ssDNA 区域,在细菌DNA复制过程中起着重要的结构性作用。SSB被广泛地用于标记和稳定 ssDNA 区域,以便用电子显微镜观察细胞内存在的 ssDNA结构。最新报道表明SSB蛋白可以提高RT-PCR 中反转录的效率、促进限制性内切酶的消化反应、增强T4 DNA 聚合酶的活性和提高 PCR 的产量。
本公司耐热细菌SSB 是重组表达,并经多步纯化的重组蛋白,分子量约为29 kDa的蛋白质,与T4 SSB具有相同的应用效果,并具有很好的热稳定性,尤其适合于高温反应。
活性定义
本品按纯蛋白质量销售。
浓度:5mg/ml
保存条件:-20℃保存
特点
Ø 在 RT-PCR 过程中,增加反转录的产量和延伸能力;
Ø PCR时,增加目的片段的产量和特异性;
Ø 稳定和标记 ssDNA 结构;
Ø 热稳定性好,耐受75°C保温30分钟,活性未见损失。
Ø 适用于所有PCR buffer、等温核酸扩增buffer。
适用范围
Ø PCR、反转录反应、体外RNA转录;
Ø 其它需要结合ssDNA的实验。
产品包装规格及组成
Component | AE1902A | AE1902B | AE1902C |
耐热细菌SSB | 0.2mg | 1mg | 4mg |
质量控制
相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。
酶贮存缓冲液
20 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,0.5 mM DTT,1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 8 @ 25°C。
相关产品:
Taq DNA聚合酶、忠实性DNA聚合酶等各种PCR酶、Bsu DNA聚合酶(大片段)等
使用实例:
1、降低PCR的引物二聚体
1)在冰上按下表配制反应体系
反应组分 | 体积或浓度 |
10×PCR Buffer | 5ul |
Tth SSB | 1-2ul |
引物-F(10uM) | 1.5 |
引物-R(10uM) | 1.5 |
DNA template | 10-100ng |
Taq酶(5U/µl) | 0.5ul |
H2O | Y ul |
总体积 | 50ul |
2)PCR反应,
3)琼脂糖电泳检测扩增产物,或按实验目的进行后续操作。
警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。
注意事项
l 反转录实验应该遵守RNA操作规则,并添加RNase Inhibitor。
l 95°C半衰期为8分钟,72度保温2小时未见明显失活。