本酶催化3´→5´磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5´-磷酸末端和 3´-羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为AMP和PPi。作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。

本公司T4 RNA连接酶1是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1活性单位指在37℃下，1× T4 RNA连接酶反应缓冲体系下，30 min内将1 nmol的5´-[32P] rA16转化成磷酸盐不溶物所需的酶量。

活性测定条件

50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT，加入1 mM ATP，37℃温育。

浓度：10U/μl

保存条件：-20℃可保存2年，避免反复冻融

特点与适用范围

Ø  连接单链RNA和DNA

Ø  用5´-[32P] pCp进行RNA 3´末端标记

Ø  RNA和DNA分子内及分子间的连接

Ø  合成单链寡脱氧核苷酸

产品包装规格及组成

质量控制

经过严格的质控检测，无单链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase和磷酸酶污染。

酶贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.4 @ 25°C

使用实例：

1）按下表配制反应体系

2）37℃×30min反应，

3）65℃×15min失活酶，

4）尿素变性PAGE电泳检测酶切产物，或按实验目的进行后续操作。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l  pCp的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的DMSO。

l  热失活：65℃×15min或煮沸2min

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