本试剂盒可以将DNA 片段高效插入载体的任意位点,克隆中不需要 T4 DNA 连接酶。
重组克隆是一种简单、快速、高效的 DNA 无缝克隆技术,可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。首先将载体线性化,通过在 PCR 引物 5'端加入线性化载体的 15-20 个碱基的末端序列,使得 PCR 产物 5'和 3' 末端带有和线性化载体末端相同的序列。将该 PCR 产物和线性化载体按一定比例混合后,在重组酶作用下, 50°C 反应 15-30 min 即可进行转化,完成定向克隆。
本公司重组克隆试剂盒基于独特的非连接酶依赖体系,极大地降低了载体自连背景,阳性克隆率可达 95%以上。改良的重组酶与优化的反应缓冲液,显著提高重组效率,使得线性化载体与插入片段不进行纯化直接用于重组克隆成为可能,极大的简化了实验步骤。
◇快速克隆
◇高通量克隆
◇无缝克隆
◇DNA 定点突变